酶联免疫分析试剂盒基本原理是利用抗原抗体反应的特异性，通过将待测物与酶连接，然后酶与底物产生颜色反应，其所生成的颜色深浅与待测抗原（或抗体）的含量成正比。这种有色产物可用肉眼、光学显微镜、电子显微镜观察，也可以用分光光度计（酶标仪）加以测定。由于ELISA是基于抗原抗体反应的特异性，这意味着该种方法的测定对象既可为抗原也可为抗体：当被分析样本为抗原时，检测试剂可针对该种抗原产生特异性的抗体；当被分析样本为抗体时，则其目标抗原可用作结合的试剂。
酶联免疫分析试剂盒具体的操作流程：
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3. 样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
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