小鼠碱性磷酸酶（AKP）ELISA试剂盒使用注意事项

实验原理：

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠碱性磷酸酶（AKP）水平。用纯化的小鼠碱性磷酸酶（AKP）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入碱性磷酸酶（AKP），再与HRP标记的碱性磷酸酶（AKP）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的碱性磷酸酶（AKP）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠碱性磷酸酶（AKP）活性浓度。

注意事项：

1、试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2、浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3、各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4、请每次测定的同时做标准曲线，建议做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5、封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6、底物请避光保存。

7、严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。

8、所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9、本试剂不同批号组分不得混用。