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转基因大豆品系MON87751核酸检测试剂盒

简要描述:转基因检测系列产品可针对食品、饲料等样品中转基因成分的特异核酸片段进行扩增,通过实时扩增曲线判定结果。转基因大豆品系MON87751核酸检测试剂盒用于转基因大豆品系 MON87751 成分的检测,检出限为 0.01%。

  • 更新时间:2024-06-27
  • 厂商性质:生产厂家
  • 生产地址:上海
  • 访  问  量:1160

详细介绍

品牌YLKBIO纯度100
货号YLK10350P规格48T
供货周期现货主要用途科研实验
应用领域化工,生物产业中文名称转基因大豆品系?MON87751?核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
保存条件-20℃保存有效期15个月
A-MON87751-P1000?μL?×?1?支PG-MON87751-P100?μL?×?1?支
NG-P100?μL?×?2?支

转基因大豆品系MON87751核酸检测试剂盒

【产品名称】

通用名称:转基因大豆品系MON87751核酸检测试剂盒

Name:Transgenic soybean MON87751 line fluorescent PCR kit

【包装规格】48T/盒

【产品说明】

转基因检测系列产品可针对食品、饲料等样品中转基因成分的特异核酸片段进行扩增,通过实时扩增曲线判定结果。本产品用于转基因大豆品系 MON87751 成分的检测,检出限为 0.01%。

【产品组成】

试剂含量
A-MON87751-P1000 μL × 1 支
NG-P100 μL × 2 支
PG-MON87751-P100 μL × 1 支





【适应仪器】

ABI 7500、CFX 96、Mx 3005P、LineGene9600 等实时荧光 PCR 仪。

【自备耗材和仪器】

①冰盒;②移液器(0.5-10 μL,10-100 μL,100-1000 μL)及配套灭菌吸头;③灭菌 0.2 mL PCR 管或八联管;

④离心机;⑤涡旋混匀器;⑥金属浴;⑦均质机、搅拌机或研钵等研磨器具;⑧电子天平。

【 注意事项】

1.      本试剂检测灵敏度高。为了防止污染,实验要分区操作。

1) 第一区:试剂准备区。

2) 第二区:样本制备区。

3) 第三区:扩增及产物分析区。

★ 分区之间最好进行物理性隔离,避免人为因素造成的污染。

2.      实验过程中穿戴工作服和乳胶手套,不同区域独立使用工具,需更换手套和实验服。

3.      严格按照操作步骤操作,试剂配制和加样等步骤请严格按照说明书要求在冰盒上操作。

4.      反应液中的成分对光敏感,应避光保存。试剂使用前要wan全解冻,但应避免反复冻融,推荐使用前离心 30

秒,并按检测频次将反应液以适当体积分管保存。

5.      反应结束后,扩增管请置于密封袋内丢弃,当日清理,开盖易造成气溶胶污染,禁止开盖。

6.      不同批号试剂请勿混合使用,在有效期内使用。

【样品处理】

参照《GB/T 19495.3-2004 转基因产品检测 核酸提取纯化方法》或其他标准处理样品,除了处于食物和(或) 饲料链起始端的农产品和粗加工材料(如粉碎的产品),大多数工业加工的食品经过了物理、化学及酶的处理。这些处理会降低 DNA 的含量及纯度。因此,每一方法的适用性及重复性会随特异样品而异,一种特定的 DNA/提取方法的性质特征依赖于被研究的食品种类。实验室样品的代表性应符合《GB/T 19495.7-2004 转基因产品检测抽样和制样方法》。制备的样本保存待用。

★ 若使用非一次性研磨器研磨样品,一定要che底清洗研磨器并充分干燥后再进行下一份样品的研磨,防止交叉污染。

【实验操作】

1.    试剂配制(试剂准备区,放置于冰盒中进行):

若有 N 个待检样品,则参照下表,按照 N+2 个数量计算反应液用量(N 个待检样品+1 个空白对照+1 个阳性照),涡旋混匀,离心 30 秒,分装于 0.2 mL PCR 管中。

试剂

使用量

A-MON87751-P

20×(N+2) μL

反应液总体积

20×(N+2) μL





2.      模板制备(样本制备区)

建议使用配套植物基因组 DNA/提取试剂盒,具体过程详见产品说明书。

3.      添加模板(样本制备区,放置于冰盒上进行)

在步骤 1 中已含有反应液的 PCR 管中加入 5 μL 模板,顺序为 NG-P、待测样品模板、PG-MON87751-P。涡旋混匀,离心 30 秒,立即进行 PCR 扩增反应。

4.      扩增反应(扩增及产物分析区)

使用荧光定量 PCR 仪,荧光基团选择 FAM,淬灭基团选择 NONE。按下列条件设置扩增反应:


PCR 循环

荧光收集位点

去污染

37℃

10 分钟

1 个循环

预变性

95℃

5 分钟

1 个循环

扩增

95℃

15 秒

40 个循环

60℃

1 分钟








5.      基线和阈值设定

基线调整取 3-15 个循环的荧光信号,阈值线应超过空白对照扩增曲线的最高点。

【结果判定】

测试样品检测 Ct 值≥40,曲线为直线或轻微斜线,无“S"型扩增曲线,可判定样品不含有 MON87751 品系或含量低于检出限;

测试样品检测 Ct 值≤36,曲线呈“S"型扩增曲线,可判定样品含有 MON87751 品系;

测试样品检测 Ct 值在 36~40 之间,应调整模板浓度,重做实时荧光 PCR。再次扩增后的样品检测 Ct 值<40, 则可判定样品含有 MON87751 品系;再次扩增后的样品检测 Ct 值≥40,则可判定该样品不含有 MON87751 品系或含量低于检出限。

★NG 反应为平滑直线,PG 反应为“S"型扩增曲线,此次检测结果有效,否则无效。如重复检测结果仍为无效,请与技术支持人员联系。

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