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人真皮微血管内皮细胞

简要描述：人真皮微血管内皮细胞分离自真皮组织。真皮，位于表皮深层，向下与皮下组织相连，真皮结缔组织的胶原纤维和弹性纤维互相交织在一起，埋于基质内。其内分布着各种结缔组织细胞和大量的胶原纤维弹性纤维，使皮肤既有弹性，又有韧性。其由两层组成——乳头层与网状层。真皮的结构组成是胶原蛋白、弹性纤维以及基质。微血管内皮细胞(M EC) 在炎症反应、肿瘤生长、创面愈合过程中起着非常重要的作用。

更新时间：2024-07-09
厂商性质：生产厂家
生产地址：上海
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科研细胞

细胞系原代细胞

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详细介绍

品牌	ATCC	货号	YLK-XB0597h
规格	5*10^5	供货周期	现货
主要用途	科研	应用领域	化工,生物产业
组织来源	皮肤组织

人真皮微血管内皮细胞

产品名称：人真皮微血管内皮细胞

产品货号：YLK-XB0597h

组织来源：皮肤组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

细胞简介：

真皮微血管内皮细胞分离自真皮组织。真皮，位于表皮深层，向下与皮下组织相连，真皮结缔组织的胶原纤维和弹性纤维互相交织在一起，埋于基质内。其内分布着各种结缔组织细胞和大量的胶原纤维弹性纤维，使皮肤既有弹性，又有韧性。其由两层组成——乳头层与网状层。真皮的结构组成是胶原蛋白、弹性纤维以及基质。微血管内皮细胞(M EC) 在炎症反应、肿瘤生长、创面愈合过程中起着非常重要的作用。

在创面愈合研究领域，由于表皮细胞、真皮成纤维细胞体外培养技术的成熟，人们对这两种细胞早已进行了大量深入的研究。与之相比，对参与创面愈合过程的另一种主要细胞——真皮微血管内皮细胞，则因其体外分离培养技术的困难而使相关的研究受限。

细胞特性

1)细胞来源于手术切除的正常包皮组织。

2)细胞鉴定：vWF免疫荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5)细胞生长方式：多角形细胞，贴壁培养。

质量检测

优利科生物实验室分离的该细胞经Vim entin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息

包被条件：PLL(0. 1m g/ml) ，明胶(0. 1%)

培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：内皮细胞样

传代特性：可传2-3代

传代比例：1:2

消化液：0. 25% 胰蛋白/酶

培养条件：气相：空气，95% 。C O2，5%

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作

1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。

2. 贴壁细胞消化

1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次。

2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白/酶消化液，37℃温浴1-3min。倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完培终止消化。

3) 用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完培至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。

4) 待细胞贴壁后，培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完培。

3. 细胞收货脱落

1) 收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀。

2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)。消化完向离心管内加入5ml完培终止消化。

3) 经1000rpm离心5min丢弃上清，用5ml完培基重悬沉淀，接种于新的培养瓶内。

4) 待细胞贴壁后，培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完培(37℃预热)。

5) 原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。

4. 细胞实验

因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验。包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2），多聚赖氨酸PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。

注意事项

1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。

2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。

3. 传代培养过程中，胰/酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。

4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。

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