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大鼠骨内膜间充质干细胞

简要描述：大鼠骨内膜间充质干细胞分离自股骨、胫骨。骨内膜是一层致密结缔组织膜，覆盖在骨的表面(关节面除外) ，新鲜骨内膜呈粉红色，含有丰富的血管、神经和成骨细胞。

更新时间：2024-07-10
厂商性质：生产厂家
生产地址：上海
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科研细胞

细胞系原代细胞

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详细介绍

品牌	YLKBIO	货号	YLK-XB1186h
规格	5*10^5	供货周期	现货
主要用途	科研	应用领域	化工,生物产业
组织来源	股骨、胫骨

大鼠骨内膜间充质干细胞

产品名称：大鼠骨内膜间充质干细胞

产品货号：YLK-XB1186h

组织来源：股骨、胫骨

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

细胞简介：

骨内膜间充质干细胞分离自股骨、胫骨。骨内膜是一层致密结缔组织膜，覆盖在骨的表面(关节面除外) ，新鲜骨内膜呈粉红色，含有丰富的血管、神经和成骨细胞。此外，附着于骨的肌腱、韧带于附着部位都与骨内膜编织在一起。因而骨内膜与骨质结合甚为牢固。骨内膜富含血管、神经，通过骨质的滋养孔分布于骨质和骨髓。骨内膜分内、外两层，外层主要是粗大的胶原纤维束，部分纤维穿入骨质，使骨内膜固定于骨面。内层疏松，含成骨细胞和破骨细胞(分别具有产生新骨质和改建骨的功能) 。

骨髓腔和骨松质的网眼也衬着一层菲薄的结缔组织膜，叫做骨膜。骨内膜的内层和骨膜有分化成骨细胞和破骨细胞的能力，以形成新骨质和破坏、改造已生成的骨质，所以对骨的发生、生长、修复等具有重要意义。骨内膜间充质干细胞是一种具有高度自我更新能力和多向分化潜能的干细胞，可以向骨、软骨、肌组织、皮肤、脂肪、神经等多种组织分化，因此可以作为组织工程中的种子细胞。骨内膜间充质干细胞的体外培养条件要求较高，在培养过程中，受贴壁时间、种植密度、血清含量、培养温度和培养基pH 值等条件的影响。

质量检测

优利科生物实验室分离的该细胞经Vim entin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息

培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传5代左右。3代以内状态最佳

传代比例：1:2

消化液：0. 25% 胰蛋白/酶

培养条件：气相：空气，95% 。C O2，5%

该细胞体外培养周期有限。建议使用优利科生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作

1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。

2. 贴壁细胞消化

1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次。

2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白/酶消化液，37℃温浴1-3min。倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完培终止消化。

3) 用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完培至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。

4) 待细胞贴壁后，培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完培。

3. 细胞收货脱落

1) 收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀。

2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)。消化完向离心管内加入5ml完培终止消化。

3) 经1000rpm离心5min丢弃上清，用5ml完培基重悬沉淀，接种于新的培养瓶内。

4) 待细胞贴壁后，培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完培(37℃预热)。

5) 原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。

4. 细胞实验

因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验。包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2），多聚赖氨酸PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。

注意事项

1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。

2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。

3. 传代培养过程中，胰/酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。

4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。

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