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大鼠脊髓成纤维细胞

简要描述:大鼠脊髓成纤维细胞脊髓是中枢神经的一部分,位于脊椎骨组成的椎管内,呈长圆柱状。成纤维细胞是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。脊髓成纤维细胞的主要功能为:构造和维持组织的正常形态,合成和释放细胞外基质等。

  • 更新时间:2024-07-10
  • 厂商性质:生产厂家
  • 生产地址:上海
  • 访  问  量:314

详细介绍

品牌YLKBIO货号YLK-XB1191h
规格5*10^5供货周期现货
主要用途科研应用领域化工,生物产业
组织来源脊髓组织

大鼠脊髓成纤维细胞

产品名称 :大鼠脊髓成纤维细胞

产品货号 :YLK-XB1191h

组织来源 :脊髓组织

产品规格 :5×105cells/T25细胞培养瓶


细胞简介:

脊髓成纤维细胞分离自脊髓组织。脊髓是细细的管束状的神经结构,位于脊柱的椎管内且被脊椎保护。是源自脑的中枢神经系统延伸部分。中枢神经系统的细胞依靠复杂的联系来处理传递信息。脊髓的主要功能是传送脑与外周之间的神经信息。人和脊椎动物中枢神经系统的一部分,在椎管里面,上端连接延髓,两旁发出成对的神经,分布到四肢、体壁和内脏。脊髓的内部有一个H 形(蝴蝶型) 灰质区,主要由神经细胞构成。在灰质区周围为白质区,主要由有髓神经纤维组成。脊髓是许多简单反射的中枢。脊髓两旁发出许多成对的神经(称为脊神经) 分布到全身皮肤、肌肉和内脏器官。脊髓是周围神经与脑之间的通路,也是许多简单反射活动的低级中枢。按脊神经的出入可把脊髓也分为相应的31节,31对脊神经就是由不同的脊椎发出的。成纤维细胞(Fibroblast) 是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。

成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化。成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的脊髓成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30m in细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起。6h后细胞基本贴壁wan全,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团。细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,  呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状。细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。脊髓成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括:构造和维持组织的正常形态。合成和释放细胞外基质。组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。


细胞特性

1) 组织来源于实验动物的正常脊髓组织。

2) 细胞鉴定:波形蛋白(Vimentin)免疫荧光染色为阳性。

3) 经鉴定细胞纯度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5) 细胞生长方式:梭形,不规则细胞,贴壁培养。


量检测

优利科生物实验室分离的该细胞经Vim entin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。


培养信息

培 养 基 :含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 :每2-3天换液一次
生长特性 :贴壁
细胞形态 :成纤维细胞样
传代特性 :可传5代左右。3代以内状态最佳
传代比例 :1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白/酶
培养条件 :气相 :空气,95% 。C O2,5%

该细胞体外培养周期有限。建议使用优利科生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。


客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作

1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。

2. 贴壁细胞消化
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃温浴1-3min。倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完培终止消化。
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4) 待细胞贴壁后,培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完培。
3. 细胞收货脱落
1) 收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)。消化完向离心管内加入5ml完培终止消化。
3) 经1000rpm离心5min丢弃上清,用5ml完培基重悬沉淀,接种于新的培养瓶内。
4) 待细胞贴壁后,培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完培(37℃预热)。
5) 原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
4. 细胞实验

因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验。包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。


注意事项

1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。

2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰/酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。

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